實驗中所使用的玻璃器皿清潔與否直接影響實驗結果。由於器皿的不清潔或被污染,往往造成較大的實驗誤差,甚至會出現相反的實驗結果。因此,玻璃器皿在使用前必須洗刷乾淨。洗滌液的選擇也很重要,洗滌液的種類很多,有些洗滌液配置方法有多種,可以根據實驗條件配製所需的洗滌液。
一、玻璃器皿的清洗
1、初用玻璃器皿的清洗
新購買的玻璃器皿表面常附著有游離的鹼性物質,先用肥皂水(或去污粉)洗刷,再用自來水洗淨,然後浸泡在1%~2%鹽酸溶液中過夜(不少於4h),再用自來水沖洗,最後用蒸餾水沖洗2~3次,在100~130℃烘箱內烘乾備用。
2、使用過的玻璃器皿的清洗
(1)一般玻璃器皿
如試管、燒杯、錐形瓶等(包括量筒)。先用自來水洗刷至無汙物,再選用大小合適的毛刷蘸取去污粉(摻入肥皂粉)刷洗或浸入肥皂水內。將器皿內外,特別是內壁,細心刷洗,用自來水沖洗乾淨後再用蒸餾水洗2~3次,熱的肥皂水去汙能力更強,可有效地洗去器皿上的油污。洗衣粉與去污粉較難沖洗乾淨而常在器壁上附有一層微小粒子,故要用水多次甚至10次以上充分沖洗,或可用稀鹽酸搖洗一次,再用水沖洗,烘乾或倒置在清潔處備用。凡洗淨的玻璃器皿,不應在器壁上帶有水珠,否則表示尚未洗乾淨,應再按上述方法重新洗滌。若發現內壁有難以去掉的汙跡,應分別使用下述的各種洗滌劑予以清除,再重新沖洗。 用過的載玻片與蓋玻片如滴有香柏油,要先用皺紋紙擦去或浸在二甲苯內搖晃幾次,使油垢溶解。再在肥皂水中煮5~10min,用軟布或脫脂棉擦拭,立即用自來水沖洗,然後在稀洗滌液中浸泡0.5~2h,自來水沖去洗滌液,最後用蒸餾水換洗數次,待幹後,浸於95%乙醇中保存備用,使用時在火焰上燒去乙醇。用此法洗滌和保存的載玻片和蓋玻片清潔透亮,沒有水珠。檢查過活菌的載玻片或蓋玻片應先在2%新潔爾滅溶液中浸泡24h,然後按上述方法洗滌方法洗滌與保存。 玻璃器皿經洗滌後,若內壁的水均勻分佈成一薄層,表示油垢完全洗淨,若掛有水珠,則還需要用洗滌液浸泡數小時,然後用自來水充分沖洗,最後用蒸餾水洗2~3次後備用。
(2)量器
如吸量管、滴定管、量瓶等。使用後應立即浸泡於涼水中,勿使物質乾涸。工作完畢後用流水沖洗,以除去附著的試劑、蛋白質等物質,晾乾後浸泡在鉻酸洗液中4~6h(或過夜),再用自來水充分沖洗,最後用蒸餾水沖洗2~4次,風乾備用。
(3)其他
具有傳染性樣品的容器(如分子克隆、病毒玷污過的容器),常規先進行高壓滅菌或其他形式的消毒,再進行清洗。
盛過各種毒品(特別是劇毒藥品和放射性核素物質的容器)必須經過專門處理,確認沒有殘餘毒物存在時方可進行清洗。
裝有固體培養基的器皿應先將其刮去,然後洗滌。
帶菌的器皿在洗滌前先浸在2%煤酚皂溶液(來蘇水)或0.25%新潔爾滅消毒液內24h或煮沸0.5h,再用上述方法洗滌。
3、細胞培養級玻璃器皿的洗滌處理
(1)按上述方法對玻璃器皿進行初洗,晾乾。
(2)將玻璃器皿浸泡入洗液中,24~48h。注意玻璃器皿內應全部充滿洗液,操作時小心勿將洗液濺到衣服及身體各部。
(3)取出,瀝去多餘的洗液。
(4)自來水充分沖洗。
(5)排列6桶水,前3桶為去離子水,後3桶為去離子雙蒸水。
(6)將玻璃器皿依次過6桶水,玻璃器皿在每桶中過6~8次。
(7)倒置,60℃烘乾。
(8)用硫酸紙包紮,160℃幹烤3h。
二、洗滌液的種類和配製方法
1、鉻酸洗液
重鉻酸鉀一硫酸洗液,簡稱洗液或清潔液,廣泛用於玻璃器皿的洗滌,常用的配製方法有4種:
① 取100mL工業濃硫酸置於燒杯內,小心加熱,然後慢慢地加入重鉻酸鉀粉末,邊加邊攪拌,待全部溶解後冷卻,貯於帶玻璃塞的細口瓶內。
② 稱取5g重鉻酸鉀粉末置於250mL燒杯中,加水5mL,儘量使其溶解。慢慢加入100mL濃硫酸,邊加邊攪拌,冷卻後貯存備用。
③ 稱取80g重鉻酸鉀,溶於1000mL自來水中,慢慢加入工業濃硫酸1000mL,邊加邊攪拌。
④ 稱取200g重鉻酸鉀,溶於500mL自來水中,慢慢加入工業濃硫酸500mL,邊加邊攪拌。
2、濃鹽酸(工業用)
可洗去水垢或某些無機鹽沉澱。
3、5%草酸溶液
可洗去高錳酸鉀的痕跡。
4、5%~10%磷酸三鈉(Na3PO4·12H2O)溶液
可洗滌油污物。
5、30%硝酸溶液
洗滌CO2測定儀器及微量滴管。
6、5%~10%乙二銨四乙酸二鈉(EDTA)溶液
加熱煮沸可洗去玻璃器皿內壁的白色沉澱物。
7、尿素洗滌液
為蛋白質的良好溶劑,適用于洗滌盛蛋白質製劑及血樣的容器。
8、酒精與濃硝酸混合液
最適合於洗淨滴定管,在滴定管中加入3mL酒精,然後沿管壁慢慢加入4mL濃硝酸(相對密度1.4),蓋住滴定管管口。利用所產生的氧化氮洗淨滴定管。
9、有機溶液
如丙酮、乙醇、乙醚等可用於洗脫油脂、脂溶性染料等污痕。二甲苯可洗去油漆污垢。
10、氫氧化鉀-乙醇溶液和含有高錳酸鉀的氫氧化鈉溶液
它是兩種強鹼性的洗滌液,對玻璃器皿的侵蝕性很強,清除容器內壁污垢,洗滌時間不宜過長。使用時應小心謹慎。
上述洗滌液可多次使用,但使用前必須將待洗滌的玻璃器皿先用水沖洗多次,除去肥皂液、去污粉或各種廢液。若儀器上有凡士林或羊毛脂時,應先用軟紙擦去,然後再用乙醇或乙醚擦淨。否則會使洗滌液迅速失效。例如肥皂水、有機溶劑(乙醇、甲醛等)及少量油污物均會使重鉻酸鉀-硫酸液變綠,降低洗滌能力。
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